摘要：單純皰疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)潛伏感染期間LATs的活躍轉(zhuǎn)錄可能與其啟動(dòng)子與增強(qiáng)子兩側(cè)的CTCF結(jié)合序列有關(guān)。本研究對位于UL56下游與LAT啟動(dòng)子上游之間并與CTCF結(jié)合序列重疊存在的一個(gè)新開放讀碼框(本研究中命名為UL57)進(jìn)行了鑒定。首先利用HSV-1(F)細(xì)菌人工染色體(HSV-BAC)系統(tǒng)構(gòu)建重組病毒HSV-EGFP-UL57,將EGFP序列插入U(xiǎn)L57 5’端;然后分別通過Northern Blot和Western Blot檢測EGFP標(biāo)記的UL57的轉(zhuǎn)錄和表達(dá);同時(shí)構(gòu)建敲除UL57的重組病毒HSV-ΔUL57,觀察UL57對病毒增殖的影響。結(jié)果顯示,重組病毒HSV-EGFP-UL57感染HEp-2細(xì)胞17h后,EGFP探針檢測到兩條轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,其中1.8kb轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與預(yù)測大小相符;使用放線菌酮(Cycloheximide,CHX)阻斷病毒即刻早期蛋白/早期蛋白合成后,UL57轉(zhuǎn)錄受到明顯抑制。重組病毒HSV-EGFP-UL57感染Vero細(xì)胞后,9h可見融合蛋白表達(dá),24h表達(dá)明顯;融合蛋白分子量與預(yù)測大小(58kD)一致。病毒生長曲線顯示,重組病毒HSV-EGFP-UL57及HSV-ΔUL57在Vero細(xì)胞中的增殖水平與HSV-1(F)基本一致。本研究表明,在HSV-1基因組(GenBank:GU734771.1)UL56下游與LAT啟動(dòng)子上游之間存在一個(gè)新開放讀碼框UL57(116 921bp~117 799bp),UL57可以進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,且其轉(zhuǎn)錄受病毒即刻早期蛋白/早期蛋白調(diào)控;轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以翻譯出融合蛋白,但表達(dá)水平較低。刪除UL57對病毒增殖無明顯影響。