摘要：6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGDH)是戊糖磷酸途徑的限速酶,參與生物體內(nèi)遞氫體NADPH的產(chǎn)生。通過檢索微孢子蟲數(shù)據(jù)庫獲得家蠶微孢子蟲6PGDH基因序列,以家蠶微孢子蟲鎮(zhèn)江株基因組為模板,設(shè)計(jì)特異性引物成功克隆了該基因,命名為Nb6PGDH,并對該基因進(jìn)行序列特征和表達(dá)特征分析,為了解6PGDH基因在微孢子蟲生長發(fā)育過程中的功能提供有用信息?？寺〉玫降男蛄腥L1 374 bp,包含一個(gè)完整的ORF,編碼457個(gè)氨基酸;與Gen Bank數(shù)據(jù)庫中家蠶微孢子蟲6PGDH基因長度相同,相似度為99. 42%,其中8個(gè)堿基存在差異,編碼的3個(gè)氨基酸發(fā)生改變。生物信息學(xué)分析表明Nb6PGDH蛋白沒有信號肽,無跨膜結(jié)構(gòu)域,分子質(zhì)量為51. 8 k D,等電點(diǎn)5. 83,存在38個(gè)磷酸化位點(diǎn)和2個(gè)N-糖基化位點(diǎn)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明,家蠶微孢子蟲感染家蠶后2~168 h,中腸組織中Nb6PGDH基因都有所表達(dá),且表達(dá)水平在生長發(fā)育過程中發(fā)生變化,說明Nb6PGDH基因在家蠶微孢子蟲增殖發(fā)育過程中具有一定的生理功能。