CSC誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中miRNA表達(dá)譜變化

作者:張亞平; 張佳彤; 楊薩; 李中秋; 周洋洋; 張巧 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院; 河南鄭州450001; 鄭州大學(xué)醫(yī)院; 河南鄭州450001

摘要:目的通過煙草煙霧凝集物(cigarette smoke condensate,CSC)慢性染毒永生化人支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B體外構(gòu)建惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞模型,miRNA芯片技術(shù)篩選模型中差異表達(dá)的miRNAs,發(fā)現(xiàn)與惡性轉(zhuǎn)化相關(guān)的miRNAs,為進(jìn)一步研究CSC誘導(dǎo)惡性轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法CCK-8檢測(cè)細(xì)胞存活率,確定CSC染毒終濃度。劃痕實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、MTT實(shí)驗(yàn)及凋亡檢測(cè)評(píng)估細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化情況。MiRNAs芯片檢測(cè)BEAS-2B和CSC30組細(xì)胞,明確差異表達(dá)譜。表達(dá)下調(diào)的hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證。結(jié)果CSC誘導(dǎo)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞遷移能力、克隆形成能力和增殖活力明顯增強(qiáng),凋亡率明顯下降。相對(duì)于BEAS-2B組,CSC30組細(xì)胞中有78種miRANs差異表達(dá),其中52種表達(dá)上調(diào),26種表達(dá)下調(diào)。RT-PCR驗(yàn)證hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521表達(dá)下調(diào)與芯片結(jié)果一致。結(jié)論CSC可誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,采用miRNA芯片技術(shù)篩選到miRNA差異表達(dá)譜,其可能與CSC誘導(dǎo)惡行轉(zhuǎn)化的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

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毒理學(xué)

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