中國首株副瘰疬分枝桿菌臨床分離株的生物學特征和毒力研究

作者:王桂榮; 劉冠; 于霞; 陳素婷; 梁倩; 尚媛媛; 鄭素華; 黃海榮 首都醫(yī)科大學附屬北京胸科醫(yī)院北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所國家結(jié)核病臨床實驗室北京市耐藥結(jié)核病研究重點實驗室; 101149; 首都醫(yī)科大學附屬北京胸科醫(yī)院流行病研究室; 101149

摘要:目的 對中國肺病患者體內(nèi)首次分離到的1株副瘰疬分枝桿菌進行了生物學特征與毒力研究,以提高對該分枝桿菌的認識.方法 2013年對源于2007 2008年全國耐藥基線調(diào)查的140株非結(jié)核分枝桿菌(NTM),通過聯(lián)合測定16S rRNA、16S~23S rRNA間隔區(qū)(ITS)和hs筇5基因序列進行菌種鑒定,分離到1株副瘰疬分枝桿菌.通過開展一系列標準生化試驗,包括生長試驗、硝酸還原酶測定、芳基硫酸酯酶測定、碲酸鈉還原試驗、吐溫水解試驗、尿素酶試驗,以及在50 mg/ml對硝基苯甲酸(PNB)、10 mg/ml噻吩-2-羧酸肼(TCH)、5% NaCl和麥康凱瓊脂上進行生長試驗,闡明其生物學特征.通過Alamar blue微量稀釋法測定其對利福平、乙胺丁醇、異煙肼、阿米卡星、磺胺甲惡唑、氧氟沙星、對氨基水楊酸、利福噴丁、卷曲霉素、頭孢西丁、亞胺培南、米諾環(huán)素、多西環(huán)素、克拉霉素、阿奇霉素、美羅培南、甲氧芐氨嘧啶、利福布汀、利奈唑胺、鏈霉素、丙硫異煙胺、莫西沙星和左氧氟沙星共23種抗生素的藥物敏感性.為了研究副瘰疬分枝桿菌的毒力,通過尾靜脈和腹腔注射兩種途徑感染C57BL/6小鼠,在小鼠感染后的第2、4、8周取肺臟和脾臟檢測細菌載量和病理組織學變化,確定其對小鼠的致病性.結(jié)果 該株副瘰疬分枝桿菌在37℃生長旺盛,菌落光滑并呈半球形,呈黃至橘黃色.在體外對利福布丁、利福噴丁、克拉霉素、阿奇霉素、頭孢西丁和莫西沙星敏感.在C57BL/6小鼠感染后的第2周,病理組織學結(jié)果顯示小鼠肺組織出現(xiàn)局限性炎癥反應,表現(xiàn)為外周支氣管炎性滲出.在感染后的第4和第8周,肺組織表現(xiàn)為外周支氣管炎性滲出伴有大量炎性細胞聚集,部分組織有肉芽腫生成,但無壞死.在小鼠感染的8周時間內(nèi),肺組織和脾組織中細菌載量呈逐漸上升趨勢.結(jié)論 該副瘰疬分枝桿菌在體外對利福布汀、利福噴?

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