摘要:目的:研究干細(xì)胞定向分化為內(nèi)皮細(xì)胞的效率,并與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)比較。方法:用兩步法誘導(dǎo)干細(xì)胞HUES9分化為內(nèi)皮細(xì)胞,前3 d在N2B27培養(yǎng)基中加入骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(25 ng/m L)和肝糖原合成激酶3β受體的選擇性抑制劑CHIR99021(10μmol/L)使細(xì)胞分化到中胚層狀態(tài),第4天開始用VEGF165(200 ng/m L)和Forskolin(2μmol/L)將細(xì)胞誘導(dǎo)為內(nèi)皮細(xì)胞。觀察分化第6天細(xì)胞形態(tài),并與HUVECs比較。用CD144作為內(nèi)皮細(xì)胞表面標(biāo)志物,流式細(xì)胞術(shù)檢測分化效率及分化后細(xì)胞的身份。比較兩種內(nèi)皮細(xì)胞遷移和成管能力。結(jié)果:分化后的內(nèi)皮細(xì)胞與HUVECs在顯微鏡下形態(tài)一致。分化細(xì)胞表面標(biāo)志物陽性率達(dá)到73.4%,重新培養(yǎng)后的內(nèi)皮細(xì)胞表面CD144陽性率達(dá)到86.6%,HUVECs為94.4%。分化后的內(nèi)皮細(xì)胞與HUVECs均具有良好的遷移和成管能力,但分化后的內(nèi)皮細(xì)胞能力不如HUVECs強(qiáng)。運(yùn)用SB431542后,能夠提高分化后內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和成管能力。結(jié)論:此兩步法將干細(xì)胞分化為內(nèi)皮細(xì)胞有較高的分化效率,可作為理想的分化方法。
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