摘要：為了探究燦爛弧菌中Zn2+轉運系統(tǒng)的細胞周質(zhì)組分Vs A的表達與功能,本實驗采用PCR克隆vsA基因,實時熒光定量測定vsA基因的表達,利用抗體封閉實驗研究Vs A蛋白的功能。生物信息學分析表明Vs A具有結合和轉運Zn2+的結構基礎。實時熒光定量結果表明,vsA的表達受Zn2+調(diào)控,且具有濃度依賴性,0.01 mmol/L的Zn2+可使vsA的表達量下調(diào)至對照組的0.5倍,而添加等摩爾量的Cu2+、Fe3+、Mg2+和Ca2+對vsA的表達無明顯影響。而0.1μmol/L Zn2+則會誘導vsA的表達。此外,在大腸桿菌Escherichia coli BL21 (DE3)中進行了Vs A的重組表達,制備了Vs A的小鼠多克隆抗體。利用抗體封閉Vs A蛋白可導致燦爛弧菌在Zn2+限制條件下的生長受抑制,以及過氧化氫的能力和粘附效率的降低。本研究獲得了燦爛弧菌的vsA基因,其表達受Zn2+濃度調(diào)控,Vs A蛋白在燦爛弧菌生長、抗氧化以及粘附宿主細胞過程中發(fā)揮作用。