細菌超聲分散計數(shù)儀在微生物實驗前處理中的應用

作者:馮通明; 肖美方; 王威; 崔小穎; 吳智龍; 周杰 佛山市第四人民醫(yī)院結(jié)核病科; 528000; 佛山市第四人民醫(yī)院檢驗科; 528000

摘要:目的探究細菌超聲分散計數(shù)儀在微生物實驗前處理中的應用價值。方法以9種不同菌種為實驗對象,通過肉眼觀察、革蘭染色鏡檢和菌液濁度檢測,對比傳統(tǒng)手工分散方法和儀器超聲分散方法制備菌懸液的分散效果和對細菌生長活性的影響。結(jié)果7種菌需使用低檔功率,2種菌需要使用中檔功率。不同菌種超聲處理時間不同,最長120s,最短10S。經(jīng)儀器分散獲得的菌懸液普遍均勻度更佳,無明顯菌的團聚現(xiàn)象。鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌和嗜麥芽窄食單胞菌等菌株經(jīng)手工分散和儀器分散的效果沒有明顯差異;超聲處理30s即可達到較為理想的分散效果,延長處理時間對大部分菌液濁度沒有發(fā)生明顯變化,但鮑曼不動桿菌、陰溝腸桿菌和大腸埃希菌隨超聲分散時間的延長而菌液濁度明顯下降,肺炎克雷伯菌超聲處理60S時菌液濁度達到最大值,延長處理時間濁度逐漸下降。在1:10。稀釋度下,大腸埃希菌經(jīng)儀器分散后的平板菌落數(shù)均值[(59±6)×10^5菌落形成單位(CFU)/m1)]明顯低于手工分散者[(76±8)×10^5CFU/ml)](F=10.321,P=0.033);諾卡菌屬經(jīng)儀器分散后的平板菌落數(shù)均值[(9±6)×10^5CFU/m1)]明顯高于手工分散者[(2±0)×10^5CFU/ml](F=8.693,P=0.015);其他7種菌種用儀器分散和手工分散獲得的菌懸液不存在明顯的生長活性差異。結(jié)論與手工分散方法相比,細菌超聲分散計數(shù)儀對各參試菌種的分散效果好,耗時較短,不會明顯影響菌體的生長活性,能為菌懸液制備提供一套安全、高效、標準化的解決方案,在微生物實驗前處理中具有較高的應用價值。

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結(jié)核病與肺部健康

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