摘要：[目的]基于新生大鼠心肌細胞氧糖剝離再灌注(oxygen glucose deprivation/reperfu-sion,OGD/R)模型,研究miR-19b對心肌細胞凋亡的調(diào)控作用,并初步說明其分子機制.[方法]采用酶解法提取新生大鼠心肌細胞,分別轉(zhuǎn)染mi R-19b模擬物(mimics)和抑制物(inhibitor),然后對細胞進行氧糖剝離再灌注處理,模擬心肌缺血再灌注損傷過程.采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的三磷酸脫氧尿甘(2’-deoxyuridine 5’-triphosphate,dUTP)缺節(jié)末端標記(terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP-biotin nick endlabeling,TUNEL)法,檢測心肌細胞凋亡.采用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測凋亡蛋白(Bcl2,Bax和Caspase3)以及下游分子同源磷酸酶-張力蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)和Akt的表達.[結(jié)果]TUNEL染色表明,mi R-19b mimics可以明顯降低OGD/R模型中凋亡心肌細胞比率,而miR-19b inhibitor作用則相反.蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測Bcl2,Bax和Caspase3的表達變化也與TUNEL染色結(jié)果一致.mi R-19b mimics可下調(diào)PTEN,激活A(yù)kt,而miR-19b inhibitor的作用則相反.同時轉(zhuǎn)染miR-19b inhibitor和PTEN-siRNA進行功能逆轉(zhuǎn)實驗,發(fā)現(xiàn)PTEN-siRNA可以逆轉(zhuǎn)miR-19b inhibitor對細胞凋亡的促進作用.[結(jié)論]miR-19b可通過下調(diào)PTEN激活A(yù)kt信號通路,保護心肌細胞凋亡。