摘要：利用PCR結(jié)合變性高效液相色譜法快速檢測(cè)大腸埃希菌喹諾酮耐藥決定區(qū)gyrA基因和gyrB基因突變。方法:對(duì)22株喹諾酮耐藥大腸埃希菌進(jìn)行2種基因的PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)DNA雜交形成同源和異源雙鏈后進(jìn)行變性高效液相色譜法檢測(cè)和序列測(cè)定。結(jié)果:20株試驗(yàn)菌gyrA基因出現(xiàn)異常峰型,14株試驗(yàn)菌gyrB基因出現(xiàn)異常峰型。測(cè)序證實(shí)所有異常峰型的樣本均存在突變位點(diǎn),正常單峰則無(wú)突變位點(diǎn)。其中g(shù)yrA基因存在Ser83Leu和Asp87Asn突變,突變率分別為90.9%和86.4%;gyrB基因存在Glu185Asp突變,突變率為4.5%,兩種基因均存在多個(gè)位點(diǎn)的同義突變。結(jié)論:DHPLC方法可用于快速檢測(cè)大腸埃希菌gyrA和gyrB基因突變。