摘要：目的嘗試建立分離并獲得穩(wěn)定培養(yǎng)的新生大鼠原代肝細(xì)胞(HC)的簡易方法。方法采用多步酶消化法和組織塊培養(yǎng)貼壁法分離大鼠原代HC,經(jīng)低速離心、選擇性貼壁培養(yǎng)并純化肝細(xì)胞。結(jié)果最初獲得單細(xì)胞數(shù)量約1~2×10^6個(gè)/只,經(jīng)0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞瞬時(shí)活率>72%,單細(xì)胞懸液和組織塊兩種培養(yǎng)方法均在3~5d發(fā)現(xiàn)細(xì)胞可長滿瓶底的70%~80%,經(jīng)傳代純化以后細(xì)胞經(jīng)糖原染色和抗CK-18免疫組化染色鑒定,發(fā)現(xiàn)HC純度>95%,細(xì)胞生長狀態(tài)良好,可供一般實(shí)驗(yàn)室使用。結(jié)論成功建立了獲取原代培養(yǎng)HC的簡易方法,細(xì)胞數(shù)量、純度、活率較好,可供一般實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)研究。