人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞體外多向分化能力的方法驗(yàn)證

作者:馮頂麗; 卓麗丹; 蘆笛; 李紅; 郭紅延 解放軍總醫(yī)院第三醫(yī)學(xué)中心口腔科; 北京100039; 山西醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院; 太原030001; 解放軍總醫(yī)院整形科; 北京100853; 軍科院軍事醫(yī)學(xué)研究所; 北京100850

摘要:目的探討人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)體外多向分化能力的方法。方法 iPSC通過(guò)形成擬胚體(embryonic body,EB)的階段,將其誘導(dǎo)為間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSCs)樣細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察誘導(dǎo)過(guò)程中細(xì)胞形態(tài)的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)iPSC來(lái)源的MSCs(iPS-MSCs)表面標(biāo)志物的表達(dá),并進(jìn)一步將iPSC-MSC誘導(dǎo)為成骨、軟骨細(xì)胞;或直接EB接種,將其誘導(dǎo)成神經(jīng)細(xì)胞。通過(guò)上述方法驗(yàn)證iPSC的多向分化能力。結(jié)果誘導(dǎo)后的iPSC-MSC逐漸向外生長(zhǎng)變?yōu)殚L(zhǎng)梭形;CD29、CD105在iPSC-MSCs中表達(dá)陽(yáng)性,而CD34、CD45則為陰性;堿性磷酸酶、甲苯氨蘭染色結(jié)果表明iPSC-MSCs具有成骨、成軟骨的能力;iPSC亦可直接從EB階段誘導(dǎo)成神經(jīng)細(xì)胞。結(jié)論通過(guò)上述方法,可成功誘導(dǎo)iPSC為成骨、成軟骨、成神經(jīng)細(xì)胞,為iPSC進(jìn)一步的研究與應(yīng)用提供了技術(shù)基礎(chǔ)。

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