摘要:目的:探討N-myc下游調(diào)節(jié)基因1(NDRG1)過表達(dá)對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的影響以及對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的作用。方法:采用攜帶NDRG1基因的慢病毒感染人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞系HTR-8/SVneo,建立NDRG1基因穩(wěn)定過表達(dá)的HTR-8/SVneo細(xì)胞株。qRT-PCR和Western blot法檢測(cè)慢病毒感染后細(xì)胞中NDRG1基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平,Transwell小室法觀察細(xì)胞侵襲和遷移能力,免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)β-catenin蛋白核轉(zhuǎn)位情況,Western blot法分析EMT相關(guān)蛋白、Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白及基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9等蛋白表達(dá)。結(jié)果:慢病毒介導(dǎo)NDRG1過表達(dá)后,HTR-8/SVneo細(xì)胞中NDRG1 mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)。NDRG1過表達(dá)可顯著增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲和遷移能力,并上調(diào)MMP-2、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、神經(jīng)性鈣黏附蛋白(N-cadherin)、β-catenin、Snail1和環(huán)氧化酶-2(COX-2)等蛋白的表達(dá)水平,下調(diào)上皮鈣黏蛋白(E-cadherin)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)磷酸化水平,同時(shí)促進(jìn)β-catenin蛋白由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)位。結(jié)論: NDRG1過表達(dá)可促進(jìn)HTR-8/SVneo細(xì)胞EMT過程,提高細(xì)胞侵襲和遷移能力,其機(jī)制可能與激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)。
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