心肌樣細(xì)胞和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物在體內(nèi)構(gòu)建工程化心肌組織

作者:邢玉潔; 祝領(lǐng); 朱火蘭; 趙娜; 徐晶; 劉富強(qiáng) 陜西省人民醫(yī)院心內(nèi)一科; 陜西西安710068

摘要:目的 探索以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)誘導(dǎo)分化的心肌樣細(xì)胞為種子細(xì)胞、以聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)作為支架材料,在大鼠體內(nèi)構(gòu)建工程化心肌組織的可實施性。方法 分離培養(yǎng)大鼠BMMSCs,取第3代細(xì)胞用5-氮胞苷和血管緊張素Ⅱ聯(lián)合誘導(dǎo)24 h繼續(xù)培養(yǎng)3周,將誘導(dǎo)分化的心肌樣細(xì)胞種植到PLGA支架上形成移植物,在孵箱里孵育3 d,然后將其移植到預(yù)先制備好的大鼠腹膜腔囊袋之中。4周以后,取出移植物并采用HE染色觀察心肌樣細(xì)胞的形態(tài)特征、用免疫組織化學(xué)染色法檢測工程化心肌細(xì)胞肌鈣蛋白(cTn)I的表達(dá)、透射電鏡下觀察心肌樣細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。結(jié)果 HE染色結(jié)果顯示,在PLGA支架上可見到梭形的細(xì)胞核,且心肌樣細(xì)胞分布均一;免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示PLGA-心肌樣細(xì)胞組絕大多數(shù)移植細(xì)胞表達(dá)心肌特異性蛋白cTnI;透射電鏡觀察顯示,在體內(nèi)構(gòu)建的工程化心肌組織中,可以看到肌絲沿細(xì)胞的長軸平行排列,胞漿中富含大量的線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),以及橋粒結(jié)構(gòu)、縫隙連接和Z線樣物質(zhì)。結(jié)論 成功的建立了在大鼠體內(nèi)構(gòu)建工程化心肌組織的方法。這種體內(nèi)微環(huán)境有助于移植組織或細(xì)胞的存活,在大鼠體內(nèi)構(gòu)建的工程化心肌組織具有與天然心肌組織相似的結(jié)構(gòu)。

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