摘要：研究通過(guò)制備牛外周血單核細(xì)胞,并對(duì)檢測(cè)技術(shù)各因素優(yōu)化和準(zhǔn)確性進(jìn)行驗(yàn)證,建立了牛結(jié)核γ-干擾素ELISPOT檢測(cè)方法,同時(shí)形成該平臺(tái)相應(yīng)的操作規(guī)范。結(jié)果表明,在細(xì)胞數(shù)量為1.25×105個(gè),牛單核細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間24 h,植物血凝素的濃度為200μg/mL的條件下,該牛結(jié)核γ-干擾素ELISPOT檢測(cè)體系較為穩(wěn)定,為后續(xù)研究者基于ELISPOT技術(shù)建立更多穩(wěn)定的檢測(cè)體系提供了重要理論依據(jù)。