摘要：目的:對(duì)植物乳桿菌亞硝酸鹽還原酶基因(nirS)進(jìn)行克隆及表達(dá),檢測重組酶表達(dá)情況及其酶活力。方法:以分離自傳統(tǒng)泡菜植物乳桿菌的基因組DNA為模版進(jìn)行PCR擴(kuò)增nirS;重組構(gòu)建TA克隆質(zhì)粒pMD19-T-nirS,并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH5a中保存;通過雙酶切消化將nirS基因連接到pET-32a(+)上,獲得重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-nirS,并將其轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá);重組酶經(jīng)純化后進(jìn)行SDS-PAGE電泳檢測其表達(dá)情況;重組酶經(jīng)復(fù)性后檢測其酶活力。結(jié)果:擴(kuò)增得到nirS基因并成功在大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá),所得重組酶以包涵體形式存在,酶活力為2131.5U/mg。結(jié)論:采用基因工程技術(shù)獲得亞硝酸鹽還原酶具有一定的應(yīng)用前景。