摘要:為建立一種快速、特異、敏感的SYBR greenⅠ實時定量PCR方法,檢測豬圓環(huán)病毒3型(PCV3)在感染豬體內(nèi)的分布情況和病毒含量,本研究根據(jù)PCV3的cap基因序列設(shè)計1對引物,對反應(yīng)條件、反應(yīng)體系進行優(yōu)化,建立了檢測PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ實時定量PCR方法,并對動物回歸試驗后剖檢的病料組織進行了檢測。結(jié)果,該方法比傳統(tǒng)PCR方法靈敏度高100倍,可達3.04×10^2拷貝/μL,且具有良好的特異性和重復(fù)性。在不同病料組織中均可檢測到PCV3,但不同感染豬、不同組織病毒檢出及含量有差異,其中肝臟、肺臟、頜下淋巴結(jié)中病毒含量顯著高于心臟、心包肌、腎臟等;肝中病毒拷貝數(shù)最高,達1.16×10^6拷貝/μL,表明PCV3具有一定的組織嗜性。該方法可用于PCV3的病原學(xué)監(jiān)測、流行病學(xué)調(diào)查及定量研究。
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