摘要：為建立鑒別檢測豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬德爾塔冠狀病毒(PDCoV)和豬輪狀病毒(PRoV)的方法,本研究分別針對PEDVN基因、TGEVM基因、PDCoVM基因和PRoVVP6基因設計特異性引物和TaqMan探針,經(jīng)過優(yōu)化反應條件,建立了同時檢測4種病毒的多重TaqMan熒光定量RT-PCR方法。結果顯示,該方法僅特異性擴增PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV,與豬其它主要病毒無交叉反應,特異性較強;對PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV的質粒標準品的最低檢出限分別為2.06×10^2拷貝/μL、2.06×10^2拷貝/μL、2.06×10^1拷貝/μL、2.06×10^3拷貝/μL,具有較高敏感性;組內與組間變異系數(shù)均小于1.1%,具有良好的重復性。應用該方法和普通多重RT-PCR檢測臨床采集的243份腹瀉病料樣品,兩者的符合率為96.71%。本研究建立的方法為臨床PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的鑒別檢測及流行病學調查提供了一種快速、特異、敏感、高效的技術手段。