摘要：為建立以紅色聚苯乙烯納米微球?yàn)檩d體的犬細(xì)小病毒(CPV)抗體檢測(cè)的間接凝集方法,本研究表達(dá)純化了CPV-2VP2截短的重組蛋白rsVP2,并以rsVP2為致敏原與納米微球偶聯(lián)制備了免疫彩色納米微球;通過對(duì)反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了一種快速檢測(cè)CPV-2抗體的間接凝集方法。特異性試驗(yàn)結(jié)果顯示,致敏微球僅與CPV-2陽性血清發(fā)生凝集反應(yīng),不與犬瘟熱病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的陽性血清發(fā)生凝聚反應(yīng),特異性強(qiáng);該凝集方法檢測(cè)血清中和抗體的最低效價(jià)為1∶256;同一批次制備的3份致敏微球、3個(gè)不同批次制備的致敏微球以及4℃保存90d的致敏微球與CPV-2陽性血清的凝集反應(yīng)特異性一致,凝集程度無明顯差異,重復(fù)性穩(wěn)定性均較好。該間接凝集檢測(cè)方法對(duì)40份血清樣品的檢測(cè)結(jié)果與ImmunoComb■ Canine VacciCheck試劑盒(Dot-ELISA)檢測(cè)結(jié)果的陽性符合率為97%。本研究建立的間接凝集方法為幼犬CPV-2母源抗體或免疫犬CPV-2抗體檢測(cè)提供了一種快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)的方法。