摘要:為了篩選和鑒定用于豬鏈球菌(S.suis)致病因子和致病機(jī)制研究的啟動(dòng)子,本研究通過(guò)質(zhì)譜鑒定了來(lái)自S.suis2型05ZYH33菌株的5個(gè)高豐度蛋白質(zhì),并通過(guò)其驅(qū)動(dòng)GFP蛋白和甘露糖苷酶SSU05_1921的表達(dá)水平,評(píng)估了這5個(gè)蛋白相應(yīng)的基因啟動(dòng)子的強(qiáng)弱。結(jié)果顯示,這5種蛋白質(zhì)分別為SSU05_0177、SSU05_0530、SSU05_1503、SSU05_1815和SSU05_1868,相應(yīng)的5個(gè)啟動(dòng)子P0177、P0530、P1503、P1815和P1868均能夠有效驅(qū)動(dòng)GFP在E.coli和S.suis中的高水平表達(dá),但是P1815、P0177和P1868不能驅(qū)動(dòng)SSU05_1921在S.suis中的表達(dá)。P0530和P1503能夠驅(qū)動(dòng)SSU05_1921在S.suis中的表達(dá),并且P1503啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)GFP和SSU05_1921的表達(dá)水平均比P0530啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的高兩倍以上。因此,P0530和P1503是S.suis的強(qiáng)啟動(dòng)子,并且P1503更強(qiáng)于P0530。這在高水平表達(dá)GFP用于標(biāo)記菌體,以及構(gòu)建無(wú)啟動(dòng)子基因的回復(fù)突變菌株中發(fā)揮關(guān)鍵作用,在S.suis遺傳操作中具有很好的應(yīng)用前景。
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