腸炎沙門菌icdA基因缺失株的構建及重要特性分析

作者:吳同壘; 張艷英; 陳娟; 于秀劍; 黃翠琴; 張志強; 史秋梅; 朱國強 河北科技師范學院; 河北秦皇島066004; 中國農業(yè)大學; 北京100193; 福建省家畜傳染病防治與生物技術重點試驗室; 福建龍巖364000; 揚州大學; 江蘇揚州225009

摘要:為研究腸炎沙門菌異檸檬酸脫氫酶(IDH)的功能,本研究利用λ-Red重組技術構建了腸炎沙門菌IDH編碼基因icdA缺失突變株c50336ΔicdA,對其進行生長和生化特性檢測,并通過體外模擬應激試驗、藥敏試驗、生物被膜檢測、抗蛋清殺傷、胞內存活和動物感染實驗,分析icdA基因在腸炎沙門菌致病機制中的重要作用。研究結果顯示,icdA基因缺失不影響腸炎沙門菌的生長特性和生化特性,在熱應激(42℃)、酸應激(pH3.5)和高滲應激(NaCl2.4mol/L)條件下其存活率也未出現(xiàn)顯著變化,但icdA基因缺失能夠顯著降低腸炎沙門菌對堿、低滲透壓和過氧化氫應激的抵御能力,降低腸炎沙門菌對多粘菌素B的耐藥性和生物被膜的形成能力;同時,該基因缺失能夠降低腸炎沙門菌對蛋清殺傷的防御能力、在巨噬細胞內的存活能力和其對小鼠的毒力。研究結果表明icdA基因參與腸炎沙門菌的抗應激能力、耐藥性、生物被膜形成和抗蛋清殺傷能力,從而影響細菌的毒力。本研究為腸炎沙門菌疫苗的研究奠定了重要基礎。

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