膠質(zhì)瘤miR-218與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6表達(dá)的相互關(guān)系及其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響

作者:張景敏; 孫翠云; 于士柱; 王虔; 安同嶺; 李艷艷; 孔妍玲; 溫艷軍 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院天津市神經(jīng)病學(xué)研究所天津市神經(jīng)損傷變異與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室教育部中樞神經(jīng)創(chuàng)傷修復(fù)與再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 300052

摘要:目的探討膠質(zhì)瘤細(xì)胞中miR-218及細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6(CDK6)表達(dá)變化的相互關(guān)系及其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響。方法采用組織微陣列、鎖定寡核苷酸探針原位雜交及免疫組織化學(xué)(ABC法)方法,檢測(cè)60例不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本及10例對(duì)照腦組織中miR-218、CDK6及Ki-67抗原的表達(dá)狀況,并分析三者之間的相互關(guān)系;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系(U87MG)分別被轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照序列(對(duì)照組)及miR-218mimics(mimics組),采用即時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)及免疫細(xì)胞化學(xué)方法分別檢測(cè)兩組細(xì)胞中的miR-218水平及CDK6和Ki-67表達(dá)變化,用單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)凋亡細(xì)胞。結(jié)果對(duì)照組、I~Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤組miR-218陽(yáng)性標(biāo)記指數(shù)(LI,%)分別為22.45±0.59、4.00±1.07、1.87±1.06、0.94±0.78,四組問(wèn)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05);各組CDK6L1分別為7.254-1.20、16.71±0.80、24.43±0.62、32.05±0.43,對(duì)照組與各膠質(zhì)瘤組問(wèn)及Ⅳ級(jí)組與I~Ⅱ級(jí)組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01);各組Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞密度分別為0.00±0.00、9.30±3.48、31.15±9.44、60.15±13.60[(面-4-s)/0.05mm。],各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01);miR一218LI與CDK6LI及Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞密度問(wèn)均呈顯著性負(fù)相關(guān)(r:-0.480,-0.534,P〈0.01),后兩者問(wèn)呈顯著性正相關(guān)(r=0.530,P〈0.01)。mimics組的miR-218水平明顯高于對(duì)照組,其CDK6及Ki-67LI(14.74±1.19、30.88±3.31)均明顯低于對(duì)照組(79.06±2.07、64.94±3.96,P〈0.01),而凋亡指數(shù)(68.44±7.05)明顯高于對(duì)照組(13.04±0.97),以上各指標(biāo)兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01)。結(jié)論miR-218表達(dá)水平是評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤良惡性程度的重要參考指標(biāo);其表達(dá)異常減少可導(dǎo)致膠質(zhì)瘤細(xì)胞CDK6表達(dá)及增殖活性增強(qiáng);補(bǔ)充外源性

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