摘要:目的觀察重組人Ⅲ型膠原蛋白水凝膠用于治療豬全層皮膚缺損創(chuàng)面,在創(chuàng)面愈合和血管新生,新生真皮膠原排列狀態(tài)和膠原比例等方面的影響。方法將重組人Ⅲ型膠原蛋白粉末與海藻酸鈉粉末以質(zhì)量比10∶1混合,溶于無(wú)菌磷酸鹽緩沖液中,制備成膠原蛋白含量為10%的溶液,使用時(shí)以10%Ca2+溶液交聯(lián)成凝膠狀。以巴馬小型豬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物制備動(dòng)物模型,在每頭豬背部正中線兩側(cè)旁開(kāi)2cm分別用手術(shù)刀制備3個(gè)邊長(zhǎng)5cm深達(dá)肌肉筋膜的正方形全層皮膚缺損創(chuàng)面,采用同體自身對(duì)照,實(shí)驗(yàn)組用重組人Ⅲ型膠原蛋白水凝膠治療,水凝膠外層覆蓋無(wú)菌硅膠膜保濕;陽(yáng)性對(duì)照組用可吸收性敷料治療;陰性對(duì)照組僅用無(wú)菌硅膠膜覆蓋。術(shù)后7、14、21、90d,進(jìn)行創(chuàng)面大體觀察,并取材行蘇木精-伊紅染色,光學(xué)顯微鏡下觀察創(chuàng)面修復(fù)情況、炎癥反應(yīng),免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)創(chuàng)面CD31的表達(dá)并計(jì)數(shù)新生血管數(shù)目,天狼猩紅飽和苦味酸染色偏振光觀察膠原纖維排列、Ⅲ型膠原蛋白比例。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析、SNK-q檢驗(yàn)或Kruskal Wallis H檢驗(yàn)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面肉芽組織平整,顏色鮮紅,柔軟濕潤(rùn)。光學(xué)顯微鏡下見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組較陰性對(duì)照組組織炎癥反應(yīng)輕微,創(chuàng)面修復(fù)早期肉芽組織生長(zhǎng)速度快。CD31免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,術(shù)后7、14、21d,實(shí)驗(yàn)組新生毛細(xì)血管數(shù)分別為(18.8±2.7)、(32.0±4.4)、(42.8±4.5)個(gè)/hpf,而陰性對(duì)照組僅分別為(12.0±3.0)、(16.6±2.3)、(12.6±4.1)個(gè)/hpf,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組新生毛細(xì)血管數(shù)均高于陰性對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.05)。術(shù)后14、21、90d創(chuàng)面新生真皮組織天狼猩紅飽和苦味酸染色結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組較陰性對(duì)照組膠原纖維排列規(guī)整,與陽(yáng)性對(duì)照組相似,而Ⅲ型膠原蛋白比例較陰性和陽(yáng)性對(duì)照組均升高。結(jié)論重組人Ⅲ型膠原蛋白水凝膠可促進(jìn)全層創(chuàng)面愈合和血管新生
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