摘要：目的觀察低頻電磁場（LFEMF）對三維環(huán)境中培養(yǎng)的人表皮干細胞（ESCs）增殖的影響，為LFEMF用于皮膚組織工程提供實驗依據。方法取人包皮來源的ESCs作為種子細胞，利用Ⅳ型膠原快速貼壁法體外分離純化ESCs，并種植于膠原海綿和殼聚糖支架材料，外加LFEMF治療儀（場強5mT，頻率分別為1Hz、10Hz和50Hz）刺激ESCs（30min／d），用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法（MTT）檢測支架材料細胞毒性，通過肉眼、HE染色后DAPI熒光核染色后鏡下觀察及掃描電鏡觀察ESCs生長情況，并收集培養(yǎng)2，7，10，14dESCs的DAPI核熒光染色數(shù)據，用顯微圖像軟件分析細胞增殖數(shù)目，比較各時間點細胞增殖的區(qū)別。結果LFEMF促進ESCs增殖的作用在不同頻率組間的差異和兩種支架上培養(yǎng)的ESCs增殖情況的差異均有統(tǒng)計學意義（P〈0．01），10d后膠原海綿支架上細胞增殖較殼聚糖支架上的細胞明顯（P〈0．05），各頻率組LFEMF刺激均能促進ESCs增殖，頻率不同，促增殖的效應不一（P〈0．05）。結論膠原海綿可較好地作為體外培養(yǎng)ESCs的支架，在LFEMF干預下可實現(xiàn)ESCs體外三維環(huán)境中較快擴增，LFEMF在皮膚組織工程中具有較大應用潛力。